Práctica: Tinción de Gram

Fundamento:
 
  La tinción de Gram es la prueba de reconocimiento de microorganismos por excelencia. Esta separa las baterias en dos grandes grupos: Grampositivas (en azul) y Gramnegativas (en rojo).


Material:

- Microscopio
- Muestra (en este caso S. aureus)
- Mechero de alcohol
- Asa de siembra
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Cristalizador
- Puente de tinción
- Pipeta Pasteur
- Vaso de precipitados


Reactivos:

- Cristal violeta
- Lugol
- Safranina
- Etanol al 95%


Procedimiento:

1. Hacer un frotis tomando una muestra de la colonia y mezclándola con una gota de agua destilada en un portaobjetos.
2. Secarlo al aire o con la llama del mechero
3. Cubrir la extensión con cristal violeta y dejar 3 minutos en el puente de tinción
4. Deslavar con cuidado con agua destilada con la ayuda de una pipeta Pasteur
5. Cubrir la extensión con lugol y dejar 1 minuto
6. Deslavar con agua destilada
7. Deslavar la extensión con etanol
8. Cubrir la extensión con safranina y esperar 2 minutos
9. Deslavar con agua destilada
10. Observar al microscopio


Resultados:

S. aureus es grampositivo, por lo que queda teñido de azul