miércoles, 16 de noviembre de 2016

Práctica: Dilución seriada

Fundamento
  
  Las diluciones seriadas son bancos de diluciones en las que la sustancia a disolver se va trasvasando de tubo a tubo hasta conseguir la dilución deseada. Este procedimiento es útil en las pruebas de anticuerpos, de reconocimiento, y otras muchas pruebas microbiológicas.

Material

- Matraz aforado de 100 ml
- 4 tubos de ensayo
- Micropipeta con varias boquillas
- Agitador
- Agua destilada
- Azul de metileno
- Gradilla
- Pipeta de 5 ml



Cálculos

Primeramente se hace un esquema del banco de diluciones seriadas:




  A continuación, mediante la fórmula del factor de dilución hallamos la concentración final de cada tubo, y mediante la fórmula de diluciones seriadas hallamos el volumen que hay que trasvasar de tubo a tubo, y el volumen que hay que desechar del último (la misma cifra)



Procedimiento

- En una gradilla se colocan los cuatro tubos de ensayo.


- Se echan con una pipeta 5 ml de agua destilada en cada tubo.
- Con la micropipeta se trasvasan 0,55 ml de la disolución madre al tubo 1 (se debe cambiar la punta de la pipeta al trasvasar a cada tubo). Después se homogeneiza el tubo con el agitador.


- Se repite el paso anterior, trasvasando 0,55 ml de un tubo al siguiente.
- Se desechan 0,55 ml del último tubo para que su volumen final sea de 5 ml.


Resultado

  Se consiguen 4 tubos de dilución seriada con razón 1/10 y volumen de 5 ml







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